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日本心脏病:评估iPS细胞衍生的心肌细胞移植到小鼠心脏结果!

2018-12-03来源:厚朴方舟

APEX2在来自健康人的人iPS细胞的细胞核中表达,并诱导分化成心肌细胞。然后,将该iPS细胞衍生的心肌细胞移植到模型心肌梗塞模型小鼠中。移植后6个月,用X射线显微镜观察显示移植的心肌细胞的细胞核是白色的并且成功地可视化三维排列(图1)。


图1.心肌细胞移植后6个月的X射线显微镜图像

(左)APEX 2将移植细胞的细胞核显示为白色。
(比例尺:20μm)

(右)在3D重建图像中,可以显现移植的心肌细胞的三维排列。

 此外,当用电子显微镜观察时,可以清楚地区分移植的心肌细胞和宿主心肌细胞。尽管一些未成熟的与宿主的心肌细胞,移植的心肌细胞Ž带相比和M带相对成熟的肌节这样被接纳为结构(图2)。


心肌细胞移植6图像之后的图2电子显微镜个月
(GN:核移植的心肌细胞,HN:主机心肌细胞核,Z位:Z波段,M:M带)

(左)移植的心肌细胞的细胞核通过APEX 2显示为黑色,并且可以与宿主心肌细胞清楚地区分。
(比例尺:1μm)

(右)我认识到移植的心肌细胞中相对成熟的肌节结构。
(比例尺:1μm)

 此外,从电子显微镜的三维重建图像中发现T管和双链体开始在移植的心肌细胞中形成(图3)。


图3.心肌细胞移植后6个月的电子显微镜三维重建图像

(左)APEX 2被证明是移植的心肌细胞(粉红色),并且T-管(浅蓝色)开始在移植的心肌细胞中形成。(比例尺:500 nm)

(右)在放大的图像中,似乎在移植的心肌细胞中形成两组(红色)。(比例尺:100 nm)
 

结论
在本研究中,是在人iPS细胞来源的心肌细胞的纳米结构的评价靠前次成功移植到小鼠心脏。此外,移植6个月后发现,开始是在心肌细胞移植形成T型管或一组中的两个。使用APEX2不仅移植心肌细胞的方法,也可以通过使用电子显微镜被应用于观测其他iPS细胞来源的分化细胞的移植后可用于移植的细胞的纳米结构的分析这是预料之中的。


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